猪源双歧杆菌发酵工艺的研究.doc
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猪源双歧杆菌发酵工艺的研究,摘要双歧杆菌是人体内存在的一种生理性细菌，是人体有益菌中最值得重视和研究的一种，它与人体的健康密不可分，可以说是大自然赐予人类的健康法宝。双歧杆菌的研究和生产具有很好的发展前景。双歧杆菌一般能从动物身上提取，猪的胃上皮细胞黏膜附有有大量双歧杆菌。从猪的粪便中分离出双歧杆菌，并将其扩大生产。合适的生长条件对双歧杆菌的生长...
内容介绍
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摘 要
双歧杆菌是人体内存在的一种生理性细菌，是人体有益菌中最值得重视和研究的一种，它与人体的健康密不可分，可以说是大自然赐予人类的健康法宝。双歧杆菌的研究和生产具有很好的发展前景。
双歧杆菌一般能从动物身上提取，猪的胃上皮细胞黏膜附有有大量双歧杆菌。从猪的粪便中分离出双歧杆菌，并将其扩大生产。合适的生长条件对双歧杆菌的生长速度、菌体形态、活菌数、代谢产物有良性的影响。因此通过研究，获得双歧杆菌生产的最优工艺方案有非常重要的意义。
关键词：双歧杆菌 发酵工艺
目 录
摘 要 I
ABSTRACT II
1引言 1
1.1 研究背景 1
1.1.1 研究单位简介..........................................1
1.2 双歧杆菌的作用 2
1.2.1 改善人体肠道功能......................................2
1.2.2 恢复人体菌群平衡，形成抗菌生物屏障，维护人体健康......2
1.2.3 控制人体内毒素的水平，保护肝脏病增强肝脏的解毒、排毒功能
............................................................2
1.2.4 降血脂作用，防止动脉硬化个高血压.......................2
1.2.5 免疫调节作用...........................................3
1.2.6 营养作用...............................................3
1.2.7 提高SOD酶活力，消除人体自由基.........................3
1.2.8 抗肿瘤、预防癌症.......................................4
1.3 研究意义.................................................4
1.3.1双歧杆菌开发现状........................................4
1.3.1.1 双歧杆菌因子的开发与应用 ............................4
1.3.1.2 双歧杆菌营养液 ......................................4
1.3.1.3 新型酸奶的开发与应用 ................................5
1.3.1.4 双歧杆菌药品的开发...................................5
1.3.2 双歧杆菌生物工程展望...................................5
2 材料..................................................7
2.1样品来源..................................................7
2.2主要实验试剂..............................................7
2.3主要仪器与设备............................................7
3 双歧杆菌的分离和鉴定..................................8
3.1实验方法..................................................8
3.1.1 分离纯化方法...........................................8
3.1.2 厌氧培养...............................................8
3.1.3 仔猪肠道双歧杆菌的初步鉴定.............................8
3.2 本章小结............................................9
4仔猪肠道双歧杆菌的生长特性研究 10
4.1 操作方法 10
4.1.1 试验方法 10
4.1.2 检测方法 10
4.2 培养温度 10
4.3 起始pH.............................................11
4.4 培养基的选定............................................12
4.4.1 碳源..................................................12
4.4.2 氮源..................................................12
4.4.3 生长因子..............................................12
4.5测定双歧杆菌的生长曲线............................13
4.6 本章小结.............................................15
5 双歧杆菌发酵工艺条件的优化研究........................16
5.1 双歧杆菌制剂的生产工艺流程..............................16
5.2 发酵方案的确定..........................................16
5.3 厌氧发酵培养基组成及发酵条件的确定......................16
5.3.1 厌氧发酵的培养基组成..................................16
5.3.2 发酵控制条件..........................................16
5.4 发酵液活菌数的检测......................................16
5.5 10L发酵罐扩大培养试验..................................17
5.6 100L发酵罐扩大培养试验................................18
5.7 本章小结...............................................18
6 结论与展望...............................................19
6.1 结论....................................................19
6.2 展望...............................................19
参考文献 20
附录I 培养基的配置 21
附录II 双歧杆菌的糖代谢途径...........................22
引言
1.1 研究背景
双歧杆菌属（Bifodobacterium Orla-Jensen,1924）归属于放线菌门（Actinobacteria）放线菌纲（Actinobacteria）科里氏杆菌亚纲（Coriobacteridae）双歧杆菌目（Bifidobacteriales）双歧杆菌科（Bifidobacteriaceae）。
双歧杆菌是人体内存在的一种生理性细菌，是人体有益菌中最值得重视和研究的一种，它与人体的健康密不可分，可以说是大自然赐予人类的健康法宝。Tissier于1899年和1900年首先描述了分离自哺乳婴儿粪便的一种革兰氏阳性、弯曲和常见分叉的杆菌，命名为两歧双歧杆菌。
双歧杆菌的细胞形态呈现多种多样：有短杆较规则或纤细状带有尖细末端的细胞，有呈球形的，也有长而稍弯曲的或呈各种分支或分叉形、棍棒状或勺形。单个或链状，V形、栅栏形排列或聚集成星状。革兰氏染色阳性，不抗酸，专性厌氧，无芽孢、荚膜或鞭毛，不运动，触媒隐形，硝酸盐还原阴性，靛基质阴性，明胶液化阴性，精氨酸水解阴性。最适生长温度37~41℃，初始生长最适pH6.5~7.0。发酵葡萄糖产生乳酸和醋酸。
到目前为止，已报道的双歧杆菌有28个种。主要有青春双歧杆菌（B.adolescentis）、长双歧杆菌（B.longum）、两歧双歧杆菌（B.bifidus）、精华双歧杆菌（B.essensis）、短双歧杆菌（B.breve）、乳酸双歧杆菌（B.lactis）、婴儿双歧杆菌（B.infantis）、侧芽双歧杆菌（B.laterosporus..
双歧杆菌是人体内存在的一种生理性细菌，是人体有益菌中最值得重视和研究的一种，它与人体的健康密不可分，可以说是大自然赐予人类的健康法宝。双歧杆菌的研究和生产具有很好的发展前景。
双歧杆菌一般能从动物身上提取，猪的胃上皮细胞黏膜附有有大量双歧杆菌。从猪的粪便中分离出双歧杆菌，并将其扩大生产。合适的生长条件对双歧杆菌的生长速度、菌体形态、活菌数、代谢产物有良性的影响。因此通过研究，获得双歧杆菌生产的最优工艺方案有非常重要的意义。
关键词：双歧杆菌 发酵工艺
目 录
摘 要 I
ABSTRACT II
1引言 1
1.1 研究背景 1
1.1.1 研究单位简介..........................................1
1.2 双歧杆菌的作用 2
1.2.1 改善人体肠道功能......................................2
1.2.2 恢复人体菌群平衡，形成抗菌生物屏障，维护人体健康......2
1.2.3 控制人体内毒素的水平，保护肝脏病增强肝脏的解毒、排毒功能
............................................................2
1.2.4 降血脂作用，防止动脉硬化个高血压.......................2
1.2.5 免疫调节作用...........................................3
1.2.6 营养作用...............................................3
1.2.7 提高SOD酶活力，消除人体自由基.........................3
1.2.8 抗肿瘤、预防癌症.......................................4
1.3 研究意义.................................................4
1.3.1双歧杆菌开发现状........................................4
1.3.1.1 双歧杆菌因子的开发与应用 ............................4
1.3.1.2 双歧杆菌营养液 ......................................4
1.3.1.3 新型酸奶的开发与应用 ................................5
1.3.1.4 双歧杆菌药品的开发...................................5
1.3.2 双歧杆菌生物工程展望...................................5
2 材料..................................................7
2.1样品来源..................................................7
2.2主要实验试剂..............................................7
2.3主要仪器与设备............................................7
3 双歧杆菌的分离和鉴定..................................8
3.1实验方法..................................................8
3.1.1 分离纯化方法...........................................8
3.1.2 厌氧培养...............................................8
3.1.3 仔猪肠道双歧杆菌的初步鉴定.............................8
3.2 本章小结............................................9
4仔猪肠道双歧杆菌的生长特性研究 10
4.1 操作方法 10
4.1.1 试验方法 10
4.1.2 检测方法 10
4.2 培养温度 10
4.3 起始pH.............................................11
4.4 培养基的选定............................................12
4.4.1 碳源..................................................12
4.4.2 氮源..................................................12
4.4.3 生长因子..............................................12
4.5测定双歧杆菌的生长曲线............................13
4.6 本章小结.............................................15
5 双歧杆菌发酵工艺条件的优化研究........................16
5.1 双歧杆菌制剂的生产工艺流程..............................16
5.2 发酵方案的确定..........................................16
5.3 厌氧发酵培养基组成及发酵条件的确定......................16
5.3.1 厌氧发酵的培养基组成..................................16
5.3.2 发酵控制条件..........................................16
5.4 发酵液活菌数的检测......................................16
5.5 10L发酵罐扩大培养试验..................................17
5.6 100L发酵罐扩大培养试验................................18
5.7 本章小结...............................................18
6 结论与展望...............................................19
6.1 结论....................................................19
6.2 展望...............................................19
参考文献 20
附录I 培养基的配置 21
附录II 双歧杆菌的糖代谢途径...........................22
引言
1.1 研究背景
双歧杆菌属（Bifodobacterium Orla-Jensen,1924）归属于放线菌门（Actinobacteria）放线菌纲（Actinobacteria）科里氏杆菌亚纲（Coriobacteridae）双歧杆菌目（Bifidobacteriales）双歧杆菌科（Bifidobacteriaceae）。
双歧杆菌是人体内存在的一种生理性细菌，是人体有益菌中最值得重视和研究的一种，它与人体的健康密不可分，可以说是大自然赐予人类的健康法宝。Tissier于1899年和1900年首先描述了分离自哺乳婴儿粪便的一种革兰氏阳性、弯曲和常见分叉的杆菌，命名为两歧双歧杆菌。
双歧杆菌的细胞形态呈现多种多样：有短杆较规则或纤细状带有尖细末端的细胞，有呈球形的，也有长而稍弯曲的或呈各种分支或分叉形、棍棒状或勺形。单个或链状，V形、栅栏形排列或聚集成星状。革兰氏染色阳性，不抗酸，专性厌氧，无芽孢、荚膜或鞭毛，不运动，触媒隐形，硝酸盐还原阴性，靛基质阴性，明胶液化阴性，精氨酸水解阴性。最适生长温度37~41℃，初始生长最适pH6.5~7.0。发酵葡萄糖产生乳酸和醋酸。
到目前为止，已报道的双歧杆菌有28个种。主要有青春双歧杆菌（B.adolescentis）、长双歧杆菌（B.longum）、两歧双歧杆菌（B.bifidus）、精华双歧杆菌（B.essensis）、短双歧杆菌（B.breve）、乳酸双歧杆菌（B.lactis）、婴儿双歧杆菌（B.infantis）、侧芽双歧杆菌（B.laterosporus..
