甘草水提物对细胞色素p450s的诱导作用及其对雷公藤内酯醇抗炎作用影响.doc
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甘草水提物对细胞色素p450s的诱导作用及其对雷公藤内酯醇抗炎作用影响,甘草水提物对细胞色素p450s的诱导作用及其对雷公藤内酯醇抗炎作用影响study of induction effects of licorice extracts on cytochrome p450s and their influence on triptolide anti-inflammation effec...
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甘草水提物对细胞色素P450s的诱导作用及其对雷公藤内酯醇抗炎作用影响
Study of Induction Effects of Licorice Extracts on Cytochrome P450s and their Influence on Triptolide Anti-Inflammation Effects
2.57万字 41页
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目 录
第一章 综述 2
1.1 前言 3
1.2 中草药甘草 3
1.2.1甘草的形态特征及药材性状 2
1.2.2甘草的主要化学成分 3
1.2.3甘草的药理用途 4
1.2.4甘草的解毒机理 7
1.2.5生甘草与炙甘草的区别 6
1.3 CYP450酶 14
1.3.1 CYP450酶及其亚型概述 14
1.3.2 CYP450酶的代谢作用 14
1.3.3 CYP450酶在新药研发和临床安全用药中的应用 12
1.3.4CYP450酶在中药相互作用的影响 12
1.3.5甘草对CYP450的调控作用 14
1.5 雷公藤内酯醇 14
1.5.1 雷公藤内酯醇概述 15
1.5.2 雷公藤内酯醇的药理作用 18
1.5.3 雷公藤内酯醇的临床不良反应 19
第二章 实验部分 20
2.1实验仪器和材料 20
2.1.1仪器与设备 21
2.1.2药品与试剂 21
2.1.3实验动物 21
2.2药品的配制 21
2.2.1 甘草药液制备 21
2.2.2 TP注射液制备 22
2.2.3 Western-Blot相关试剂的配制 22
2.3实验方法 22
2.3.1甘草水煎液的制备 22
2.3.2 肝微粒体的制备 22
2.3.3 Lowery法进行微粒体蛋白含量测定 23
2.4 Western-Blot实验步骤 23
2.4.1 SDS－PAGE电泳 23
2.4.2转膜 23
2.4.3膜处理 25
2.4.4 ECL 显色 25
2.4.5凝胶图象分析 25
2.5 甘草灌胃实验 25
2.6 提取肝微粒体 26
2.7 小鼠肿胀实验 26
2.8 数据处理 26
第三章 结果 27
第四章 讨论 32
致谢 34
参考文献 35
摘要 在传统应用中将甘草分为生甘草和炙甘草两种，功效不同。本论文使用雷公藤内酯醇（ triptolide，TP）这种从雷公藤中分离出来的环氧二萜内酯化合物，作为模型药物验证甘草的解毒和抗炎增效效果。首先通过WB法观察两种甘草分别对SD大鼠肝内CYP450的诱导变化；最后通过肿胀实验验证生甘草对TP抗炎增效作用。目的：通过甘草对雷公藤内酯醇药代动力学实验，阐明甘草对雷公藤的肝药酶诱导减毒机制。方法：实验使用甘草灌胃处理SD大鼠，连续十五天后用Western blot 方法检测大鼠肝微粒体中CYP3A4、CYPOR、CYP1A1、CYP2A、CYP1A2、CYP2B1/2B2的含量。结果：（1）甘草对CYP3A4有很强的诱导作用（P < 0.01）；对CYP1A1、CYP1A2和CYP2B1/2有较强的诱导作用（P < 0.05）。（2）TP单用组，甘草低剂量（7.5gR26;kg-1）与TP联用组、甘草高剂量（15gR26;kg-1）与TP联用组对二甲苯致小鼠耳肿胀抑制率分别为9.03%、18.06%和22.31%。结论：本研究显示甘草对CYP3A4、CYP1A1、CYP1A2和CYP2B1/2有诱导作用，对TP抗炎作用能够起到减毒增效作用。
关键词：甘草；解毒；雷公藤内酯醇；Western Blot
Study of Induction Effects of Licorice Extracts on Cytochrome P450s and their Influence on Triptolide Anti-Inflammation Effects
2.57万字 41页
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目 录
第一章 综述 2
1.1 前言 3
1.2 中草药甘草 3
1.2.1甘草的形态特征及药材性状 2
1.2.2甘草的主要化学成分 3
1.2.3甘草的药理用途 4
1.2.4甘草的解毒机理 7
1.2.5生甘草与炙甘草的区别 6
1.3 CYP450酶 14
1.3.1 CYP450酶及其亚型概述 14
1.3.2 CYP450酶的代谢作用 14
1.3.3 CYP450酶在新药研发和临床安全用药中的应用 12
1.3.4CYP450酶在中药相互作用的影响 12
1.3.5甘草对CYP450的调控作用 14
1.5 雷公藤内酯醇 14
1.5.1 雷公藤内酯醇概述 15
1.5.2 雷公藤内酯醇的药理作用 18
1.5.3 雷公藤内酯醇的临床不良反应 19
第二章 实验部分 20
2.1实验仪器和材料 20
2.1.1仪器与设备 21
2.1.2药品与试剂 21
2.1.3实验动物 21
2.2药品的配制 21
2.2.1 甘草药液制备 21
2.2.2 TP注射液制备 22
2.2.3 Western-Blot相关试剂的配制 22
2.3实验方法 22
2.3.1甘草水煎液的制备 22
2.3.2 肝微粒体的制备 22
2.3.3 Lowery法进行微粒体蛋白含量测定 23
2.4 Western-Blot实验步骤 23
2.4.1 SDS－PAGE电泳 23
2.4.2转膜 23
2.4.3膜处理 25
2.4.4 ECL 显色 25
2.4.5凝胶图象分析 25
2.5 甘草灌胃实验 25
2.6 提取肝微粒体 26
2.7 小鼠肿胀实验 26
2.8 数据处理 26
第三章 结果 27
第四章 讨论 32
致谢 34
参考文献 35
摘要 在传统应用中将甘草分为生甘草和炙甘草两种，功效不同。本论文使用雷公藤内酯醇（ triptolide，TP）这种从雷公藤中分离出来的环氧二萜内酯化合物，作为模型药物验证甘草的解毒和抗炎增效效果。首先通过WB法观察两种甘草分别对SD大鼠肝内CYP450的诱导变化；最后通过肿胀实验验证生甘草对TP抗炎增效作用。目的：通过甘草对雷公藤内酯醇药代动力学实验，阐明甘草对雷公藤的肝药酶诱导减毒机制。方法：实验使用甘草灌胃处理SD大鼠，连续十五天后用Western blot 方法检测大鼠肝微粒体中CYP3A4、CYPOR、CYP1A1、CYP2A、CYP1A2、CYP2B1/2B2的含量。结果：（1）甘草对CYP3A4有很强的诱导作用（P < 0.01）；对CYP1A1、CYP1A2和CYP2B1/2有较强的诱导作用（P < 0.05）。（2）TP单用组，甘草低剂量（7.5gR26;kg-1）与TP联用组、甘草高剂量（15gR26;kg-1）与TP联用组对二甲苯致小鼠耳肿胀抑制率分别为9.03%、18.06%和22.31%。结论：本研究显示甘草对CYP3A4、CYP1A1、CYP1A2和CYP2B1/2有诱导作用，对TP抗炎作用能够起到减毒增效作用。
关键词：甘草；解毒；雷公藤内酯醇；Western Blot
