宏基因组木醋杆菌木糖醇脱氢酶基因的克隆及序列分析.doc

摘   要 

木糖醇是一种天然糖醇，可作为蔗糖的代替品，也可制取表面活性剂、乳化剂、破乳剂、醇酸树脂及涂料，广泛用于医药工业制造各种药物的原料、糖尿病患者食品的生产及食品、医药等行业。以资源丰富的葡萄糖为底物生产木糖醇越来越受到人们的重视。但是葡萄糖发酵生产的D-阿拉伯糖醇转化生成木糖醇的转化率较低，限制了葡萄糖对木糖醇的转化。木糖醇脱氢酶，作为D-阿拉伯糖醇转化为木糖醇的生物转化的关键酶之一，在木酮糖转化为木糖醇的过程中起着至关重要的作用。

本研究将从镇江恒顺酱醋厂取得的醋醩进行富集培养后，利用改良后的提取方法获得了宏基因组DNA；根据GenBank中的Gluconobacter xylinus的木糖醇脱氢酶序列，设计引物，以宏基因组DNA为模板扩增得到全长基因，与T载体连接后进行测序，结果分析表明，木糖醇脱氢酶基因长度约800bp，与GenBank中已报道的G. xylinus木糖醇脱氢酶基因序列有最高相似性达93%（氨基酸序列相似性为95%），与Gluconobacter oxydans的木糖醇脱氢酶基因序列相似性为72.9%（氨基酸序列相似性为73%），可以确定所克隆的序列为木糖醇脱氢酶基因。序列分析显示，该基因起始密码子为：ATG，终止密码子为：TAA，序列包含有4个潜在的ORF编码信息。G. xylinus木糖醇脱氢酶含