农杆菌介导大豆遗传转化体系的建立.rar

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摘要：农杆菌介导的大豆转化体系主要包括无菌苗制备、菌株培养、农杆菌介导转化、不定芽诱导、芽伸长、生根及移栽等6个步骤。为了建立高效的农杆菌介导的转化体系，本实验以热胁迫因子8（HSP8）作为转化的目的基因，从受体材料基因型、诱导分化培养基激素配比、外植体切割部位、侵染时间等四个方面进行研究，初步确立了该转化体系以大豆品种“早熟18”为受体材料，以MS + 1.30mg/L BA + 0.25mg/L IBA + 0.6%琼脂+3%蔗糖（PH5 .6）为诱导分化培养基，切割部位为上胚轴的基部和子叶近胚轴的分生组织膨大处，切片厚度为2mm，农杆菌侵染时间为15-20分钟。

关键词：农杆菌介导；转化体系；大豆；子叶节

Establishment of an efficient transforming system mediated
by agrobacterium tumefacien in soybean
Abstract The transfer system by Agrobacterium-mediated for soybean include six steps:preparation of sterilize plant,culture of bacterial strain,transformation by agrobacterium-mediated,shoot induction,shoot elongation,root induction and transplanting.Effect of the type of receptor,age of calli,duration of infection and induction on transformation rate were studied,and a highly efficient Agrobacterium-mediated gene transfor system has been established for soybean.

Key words Agrobacterium-mediated;Transformation system;Soybean;Cotyledonary nodes

前 言
大豆（Glycine max L.）是重要的农作物和经济作物，又是工业原料和牲畜家禽的重要饲料。常规育种技术具有很大的局限性，存在育种年限长、难以打破性状连锁、多基因重组率低、抗源不足、远缘杂交困难等弊端。
近年来，人们对大豆的组织培养再生和转基因技术进行大量的研究，但到目前为止，大豆还是公认的难转化的植物之一，这是因为大豆组织培养再生困难，可重复性差，转化频率在基因型之间差异较大，遗传转化体系还不完善等原因，使利用基因工程手段对大豆进行遗传改良受到了限制。因此，只有建立良好的转基因受体系统，才有可能使转基因技术在大豆的性状改良、新品种的培育中发挥作用。
本实验通过对根癌农杆菌的Ti质粒介导热胁迫因子8（HSP 8）转化体系的初步研究，探寻影响大豆再生的诱导因素，改善植株的再生条件，来克服大豆再生困难，重复性差等问题。并在此基础上优化农杆菌介导法对大豆进行遗传转化的影响因素，建立一个适于大豆遗传转化的高效受体，为大豆基因转移技术提供依据。。。。。。。。。。。
参考文献

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