小麦hmw-gs14基因片段的基因枪转化及瞬时表达.rar

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摘要:

本实验利用基因枪法将质粒pBI121在不同金粉用量、轰击距离及轰击次数等条件下转化不同基因型小麦幼胚愈伤组织，以gus基因的瞬时表达来建立基因枪转化体系，并利用基因枪法将小麦高分子量麦谷蛋白14亚基基因片段导入小麦幼胚愈伤组织，以期使其整合至小麦基因组并得以稳定表达。结果表明，该转化体系中，1350psi，12cm和1100psi,9cm下，gus基因的阳性表达率相差不大；增加轰击次数，减少轰击距离并不能显著的提高gus 瞬时表达的阳性率；而增加金粉用量在一定程度上可提高gus瞬时表达的阳性率。
关键词: 基因枪法 小麦高分子量谷蛋白14亚基基因片段 小麦幼胚愈伤组织 瞬时表达 Gus阳性率 ；


Gene Gun Transformed HMW-GS14 gene Section and Instantaneous Expression
Abstract：
With the gene gun method ,this experiment transformed plasmid PBI121 into the immature embryonic calli of different wheat varieties at the different volumes of gold powder, different distance to bombardment, times of bombardment. Using instantaneous expression of gus to establish transformation system of gene gun method , the wheat HMW -GS14 section was transformed into wheat immature embryonic calli to make it to be recombined and expressed. It shows in this system, there are few difference on gus positive expression rate between the condition of 1350 psi/12cm and 1100psi/9cm;and raising bombardment times or reducing bombardment distances cannot increase the positive rate of gus; however ,raising volumes of gold powder can increase the positive rate of gus.

Key words:
Gene gun transformation ； Wheat HMW-GS 14 gene section; Immature embryonic callus ； Instantaneous expression； Positive rate of gus

前言
小麦作为世界上主要粮食作物之一，提高其产量及改良其品质的研究有着重要意义。目前,随着人们生活水平的不断提高，小麦的品质越来越受到重视。而我国小麦品种由于普遍缺乏5+10亚基等优质谷蛋白亚基，品质明显比国外品种差。[1，2]为此，国家每年都要花大量外汇进口优质小麦，以满足日益增长的人民生活水平的需要。加速品种改良势在必行。但是，一种植物的品质相关性状一般都是受多基因控制的数量性状，并且往往与产量相关，利用常规杂交育种方法，由于要在缺乏有效选择手段的条件下对多个基因进行操作，并且还要不影响其产量，其选育难度是可想而知的。利用外源物种的某些关键基因虽然为改善这一局面提供了很好的思路，但物种间严格的生殖隔离，又常常使这些想法变得可望而不可及。基因工程技术由于在一定程度上可以拓宽植物可利用库，近年来在植物品质育种中较受重视，并取得了一定的初步成果。由于传统育种技术存在育种周期长、品质改良及增产潜力有限等局限性，因此探索将育种周期短、品质改良及增产潜力乐观的植物转基因技术应用于小麦遗传改良研究便显得十分必要和迫切。
植物基因工程研究兴起于本世纪八十年代中期。随着生物技术的飞速发展,植物分子育种进展迅速。植物转基因技术取得了令人瞩目的成就。其诞生至今，如何将这项技术应用于小麦、水稻、玉米等农作物的遗传改良研究便始终是人们努力的重要目标之一。要实现这一目标，首先要
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