沙雷氏菌的分子生物学鉴定 论文.doc

题目 …………………………………………………………………………………Ⅰ
摘要及关键词 ………………………………………………………………………Ⅰ
1前言…………………………………………………………………………………1
1.1 沙雷氏菌的生物学特性…………………………………………………………1
1.2 沙雷氏菌的研究历史……………………………………………………………1
2 材料与方法…………………………………………………………………………1
2.1 材料………………………………………………………………………………1
2.1.1细菌和质粒材料………………………………………………………………1
2.1.2培养基…………………………………………………………………………1
2.1.3 仪器与试剂……………………………………………………………………2
2.1.3.1 仪器…………………………………………………………………………2
2.1.3.2 主要试剂……………………………………………………………………2
2.2 方法………………………………………………………………………………2
2.2.1 基因组的提取…………………………………………………………………2
2.2.2 16SrDNA的PCR扩增、纯化与回收 ………………………………………… 2
2.2.3 连接载体pMD18-T vector……………………………………………………2
2.2.4 大肠杆菌感受态转化试验……………………………………………………2
2.2.5 重组细菌的扩增与重组质粒的提取…………………………………………3
2.2.6 酶切验证………………………………………………………………………3
2.2.7 16SrDNA的序列测定…………………………………………………………3
2.2.8 系统发育分析…………………………………………………………………3
3 结果与讨论…………………………………………………………………………3
3.1 基因组的提取……………………………………………………………………3
3.2 16SrDNA的PCR扩增 ……………………………………………………………3
3.3 质粒提取…………………………………………………………………………3
3.4 酶切验证…………………………………………………………………………4
3.5 序列测定…………………………………………………………………………4
3.6 进化树的构建……………………………………………………………………5
4 结论…………………………………………………………………………………6
参考文献………………………………………………………………………………6
致谢……………………………………………………………………………………7