杂合肽囊素表达载体的构建及表达.doc
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杂合肽囊素表达载体的构建及表达,1.54万字 33页 原创作品，已通过查重系统摘要囊素三肽是禽类、哺乳类动物的重要免疫活性因子，它能够有效地提高动物的免疫力。因此，在禽类养殖业，囊素三肽被广泛用于提高禽类、家畜的抗病能力，达到降低饲养成本的目的。但是，传统的囊素生产方法主要通过活体提取、纯化的方法制备而成的，其制备过程繁...
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杂合肽囊素表达载体的构建及表达
1.54万字 33页 原创作品，已通过查重系统
摘 要
囊素三肽是禽类、哺乳类动物的重要免疫活性因子，它能够有效地提高动物的免疫力。因此，在禽类养殖业，囊素三肽被广泛用于提高禽类、家畜的抗病能力，达到降低饲养成本的目的。但是，传统的囊素生产方法主要通过活体提取、纯化的方法制备而成的，其制备过程繁琐、效率低、成本高，难以大量生产。
为了改进囊素的制备方法，本研究首先用双酶切的方法酶切含有杂合肽囊素基因（N197）的克隆载体(pPUC57-N197)上，回收、纯化线性化的杂合肽囊素基因（N197），并将其与pET32a质粒表达载体连接后导入大肠杆菌体内。接着，利用SDS-PAGE方法分析了杂合肽囊素在大肠杆菌中的表达情况。接着，我们分析了不同转速（160 rpm、190 rpm、220 rpm、250 rpm），不同温度（27℃、32℃、37℃、42℃），不同菌种接种量（1%、2%、3%、4%），不同的IPTG浓度(0.5mM/L、1.0 mM/L、1.5 mM/L、2.0 mM/L)条件下，杂合肽囊素的表达量的高低。最后，实验结果表明：杂合肽肽囊素基因能够在大肠杆菌体内大量表达，其最佳表达温度为32℃，最佳诱导摇床转速为190 rpm。
关键词：囊素；诱导表达；表达条件优化；
1.54万字 33页 原创作品，已通过查重系统
摘 要
囊素三肽是禽类、哺乳类动物的重要免疫活性因子，它能够有效地提高动物的免疫力。因此，在禽类养殖业，囊素三肽被广泛用于提高禽类、家畜的抗病能力，达到降低饲养成本的目的。但是，传统的囊素生产方法主要通过活体提取、纯化的方法制备而成的，其制备过程繁琐、效率低、成本高，难以大量生产。
为了改进囊素的制备方法，本研究首先用双酶切的方法酶切含有杂合肽囊素基因（N197）的克隆载体(pPUC57-N197)上，回收、纯化线性化的杂合肽囊素基因（N197），并将其与pET32a质粒表达载体连接后导入大肠杆菌体内。接着，利用SDS-PAGE方法分析了杂合肽囊素在大肠杆菌中的表达情况。接着，我们分析了不同转速（160 rpm、190 rpm、220 rpm、250 rpm），不同温度（27℃、32℃、37℃、42℃），不同菌种接种量（1%、2%、3%、4%），不同的IPTG浓度(0.5mM/L、1.0 mM/L、1.5 mM/L、2.0 mM/L)条件下，杂合肽囊素的表达量的高低。最后，实验结果表明：杂合肽肽囊素基因能够在大肠杆菌体内大量表达，其最佳表达温度为32℃，最佳诱导摇床转速为190 rpm。
关键词：囊素；诱导表达；表达条件优化；
