镉曝露斑马鱼肌肉蛋白分离条件优化及蛋白差异点质谱鉴定.doc

镉曝露斑马鱼肌肉蛋白分离条件优化及蛋白差异点质谱鉴定

1.24万字 27页 原创作品，已通过查重系统


摘 要
镉对哺乳动物有多种毒性作用，已被证实具有致癌性，而且动物实验和对镉曝露人群调查证实，镉对肝脏，肾脏，肺，精巢，前列腺，心脏，骨骼系统，神经系统和免疫系统都有毒害作用。但是由于镉的毒性作用与其他辅因子有关，所以对镉本身的毒性机理还不是很清楚。本实验旨在对镉毒性及致癌机理进行初步的研究，并优化斑马鱼肌肉蛋白二维电泳的条件。
主要研究内容与结果如下：
（1）优化蛋白二维电泳的分离条件：使用尿素裂解液或尿素硫脲裂解液处理蛋白样品；采用丙酮沉淀与不用丙酮沉淀处理样品；采用不同pH范围胶条这三个方面来确定斑马鱼肌肉蛋白质二维电泳分离的最佳参数。结果表明，以尿素裂解液或者尿素硫脲裂解液处理提取蛋白质，用丙酮沉淀并洗涤提取的蛋白，选用pH5-8的胶条能较好的分离斑马鱼肌肉组织蛋白质。
（2）镉处理斑马鱼肌肉差异表达蛋白点的质谱鉴定：肌酸激酶蛋白，肌球蛋白轻链蛋白，慢肌球蛋白重链蛋白三种参与ATP代谢的蛋白的表达量都发生了变化。

关键词：镉; 斑马鱼; 蛋白分离条件优化；蛋白差异点质谱鉴定