芋螺毒素mviia基因的合成与鉴定.doc
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芋螺毒素mviia基因的合成与鉴定,芋螺毒素mviia基因的合成与鉴定1.34万字33页原创作品，已通过查重系统摘要芋螺毒素是一类对细胞内的离子通道和细胞上的受体具有高专一性的活性多肽。mvⅡa是从幻芋螺中提取的ω-芋螺毒素的基因，可作为神经生物学探针，在镇痛、神经保护、抗惊厥、镇咳等方面具有巨大的潜力。获得芋螺毒素的传统方法是从海洋动物芋螺中提取天然产...
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芋螺毒素MVIIA基因的合成与鉴定
1.34万字 33页 原创作品，已通过查重系统
摘要
芋螺毒素是一类对细胞内的离子通道和细胞上的受体具有高专一性的活性多肽。MVⅡA是从幻芋螺中提取的ω-芋螺毒素的基因，可作为神经生物学探针，在镇痛、神经保护、抗惊厥、镇咳等方面具有巨大的潜力。
获得芋螺毒素的传统方法是从海洋动物芋螺中提取天然产物，但分离纯化很困难且本身含量就少，因此难以获得大量的芋螺毒素，而化学合成方法成本又太高。利用基因工程方法有望在大肠杆菌、昆虫等异源表达系统中实现芋螺毒素的大量表达。
本研究借助生物信息学手段，对大肠杆菌B菌株和杆状病毒BmNPV的密码子使用频率进行分析。研究表明，在大肠杆菌B菌株中，CUA、CCU、CCC、CGA、AGA、AGG、AUA等密码子的使用频率相对较低，范围在2.1‰-5.8‰。在BmNPV基因组中， UCA、CGG、AGG、GGA、GGG等密码子的使用频率相对较低，范围在2.7‰-6.6‰。
在密码子使用频率分析的基础上，本论文在不改变氨基酸序列的前提下，对MVIIA基因的22个密码子进行了优化。采用连续PCR法合成密码子优化的芋螺毒素MVⅡA基因，经BamHI和HindIII双酶切后，连入克隆载体pUC18，经蓝白斑筛选，获得含重组质粒pUC18-MVIIA的阳性克隆，进一步测序分析，结果显示所合成的MVⅡA基因与密码子优化的MVⅡA基因序列完全一致。
综上所述，本研究成功地完成了芋螺毒素MVⅡA基因的密码子优化和MVⅡA基因的合成与鉴定，为芋螺毒素MVⅡA基因在大肠杆菌和昆虫杆状病毒表达系统中的表达分析奠定了基础。
关键词：芋螺毒素MVIIA，密码子优化，基因合成，大肠杆菌，杆状病毒
1.34万字 33页 原创作品，已通过查重系统
摘要
芋螺毒素是一类对细胞内的离子通道和细胞上的受体具有高专一性的活性多肽。MVⅡA是从幻芋螺中提取的ω-芋螺毒素的基因，可作为神经生物学探针，在镇痛、神经保护、抗惊厥、镇咳等方面具有巨大的潜力。
获得芋螺毒素的传统方法是从海洋动物芋螺中提取天然产物，但分离纯化很困难且本身含量就少，因此难以获得大量的芋螺毒素，而化学合成方法成本又太高。利用基因工程方法有望在大肠杆菌、昆虫等异源表达系统中实现芋螺毒素的大量表达。
本研究借助生物信息学手段，对大肠杆菌B菌株和杆状病毒BmNPV的密码子使用频率进行分析。研究表明，在大肠杆菌B菌株中，CUA、CCU、CCC、CGA、AGA、AGG、AUA等密码子的使用频率相对较低，范围在2.1‰-5.8‰。在BmNPV基因组中， UCA、CGG、AGG、GGA、GGG等密码子的使用频率相对较低，范围在2.7‰-6.6‰。
在密码子使用频率分析的基础上，本论文在不改变氨基酸序列的前提下，对MVIIA基因的22个密码子进行了优化。采用连续PCR法合成密码子优化的芋螺毒素MVⅡA基因，经BamHI和HindIII双酶切后，连入克隆载体pUC18，经蓝白斑筛选，获得含重组质粒pUC18-MVIIA的阳性克隆，进一步测序分析，结果显示所合成的MVⅡA基因与密码子优化的MVⅡA基因序列完全一致。
综上所述，本研究成功地完成了芋螺毒素MVⅡA基因的密码子优化和MVⅡA基因的合成与鉴定，为芋螺毒素MVⅡA基因在大肠杆菌和昆虫杆状病毒表达系统中的表达分析奠定了基础。
关键词：芋螺毒素MVIIA，密码子优化，基因合成，大肠杆菌，杆状病毒
